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放射免疫分析基本原理 |
1 优越性1.1 灵敏度高:常规的生物化学分析方法,检测体液中物质的质量,在10-3克水平,放免分析法可达到10-9~10-12克水平。
1.2 特异性强:放免分析法建立在抗原抗体反应的基础上,因此,即使分子结构很相似的物质也有很高的特异性。1.3 操作比较方便:使用的试剂大部分都有配套的试剂药盒供应,只要有进行一般检验工作的操作能力即可。
1.4 成本较低:对环境和支持设备的要求不高。2 基本原理:2.1 射线探测:放免分析标记抗原所用的放射性核素,最常用的是125I,它能放射出γ射线。用探测效率较高的仪器很容易测得浓度很低的标记抗原抗体复合物。2.2 抗原抗体反应机制:Ag+*Ag+Ab==AgAb+*AgAb(Ag—抗原、*Ag—标记有放射性的抗原、Ab—抗体) 2.3 Ag与*AgAb之间的关系:由于上述反应是竞争结合机制,即,Ag越多,产生AgAb也越多,产生*AgAb就越少,反之亦然,因此Ag与*AgAb之间呈一定的函数关系。2.4 标准曲线:取已知Ag浓度的标准样品4-10个,进行上述反应后,测得各样品的放射性含量,即*AgAb的放射性脉冲数,可得到下图所示的标准曲线。当测得病人样品的*AgAb放射性脉冲数后,即可从该标准曲线上反查出病人样品中Ag的浓度,供临床诊断使用。
参与放射免疫反应的基本试剂为Ag、*Ag和Ab,还需一种叫做分离剂的试剂将AgAb、*AgAb和未反应的Ag、*Ag分离出来。 2.6 操作步骤:采血——加样——温育——离心分离——放射性测量——计算结果 |
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